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人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  • 資料類型

    doc
  • 文件大小

    17KB
  • 上傳時間

    2025年08月13日
關鍵詞
角化細胞生長因子,KGF抗體,KGF標準品,移液器及槍頭,微孔板
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資料簡介

  以下是關于人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:

  BS-0186 人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法(或雙抗原夾心法)檢測樣本中KGF濃度。通過包被抗體/抗原與待測物結合,再與酶標抗體形成復合物,經TMB顯色后測定OD值,濃度與顏色深淺成正比。

  二、試劑盒組成

  主要組分?

  預包被微孔板(96孔或48孔)

  標準品(凍干粉,通常含2-8管,濃度0-400 pg/mL不等)

  酶標抗體、生物素化抗體、HRP標記親和素(不同品牌配置差異)

  TMB底物液、終止液(2N H?SO?)

  濃縮洗滌液(需20-30倍稀釋)

  自備物品?

  酶標儀(450nm)、移液器及槍頭

  37℃恒溫箱、蒸餾水

  三、樣本處理

  樣本類型 處理方法

  血清? 室溫凝固10-20分鐘后,2000-3000rpm離心20分鐘,避免溶血

  血漿? EDTA/肝素抗凝,離心后取上清

  細胞上清? 1000-3000rpm離心10-20分鐘去除顆粒

  組織勻漿? PBS勻漿后離心取上清,分裝保存于-20℃

  注意?:避免反復凍融;NaN?會抑制HRP活性,需排除此類樣本。

  四、操作步驟

  試劑準備?

  標準品復溶:加入指定體積稀釋液(如0.5-1mL),靜置10分鐘混勻。

  洗滌液稀釋:按1:19~1:20比例用蒸餾水配制。

  檢測流程?

  加樣:標準品/樣本每孔50-100μL。

  孵育:37℃溫育60-120分鐘。

  洗板:手工或洗板機洗滌4-6次,拍干。

  加酶標抗體:每孔100μL,37℃孵育60分鐘。

  顯色:加入TMB底物,避光反應15分鐘。

  終止:加入終止液后15分鐘內測定450nm OD值。

  五、注意事項

  保存條件?:未開封試劑盒2-8℃保存;溶解后標準品建議分裝凍存。

  精密度?:批內CV<10%,批間CV<12%。

  干擾因素?:溶血、細菌污染、反復凍融可能導致假陽性或濃度偏差。

  注:以上資料僅供參考,如需具體品牌說明可進一步提供貨號查詢詳細參數。

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