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·化學(xué)組成與概述
Aleuria Aurantia Lectin (AAL), Agarose bound 是一種將橙黃網(wǎng)孢盤菌來源的巖藻糖特異性凝集素共價偶聯(lián)到瓊脂糖凝膠珠上的親和層析介質(zhì)。
AAL蛋白結(jié)構(gòu):由約35-40 kDa亞基組成的同源二聚體/四聚體。每個亞基采用β-三葉草折疊,形成寬而淺的巖藻糖結(jié)合口袋,通過芳香族疏水作用及氫鍵特異性識別L-巖藻糖(耐受α1,2/3/4/6多種連接方式)。
偶聯(lián)結(jié)構(gòu):AAL蛋白表面的伯胺基(賴氨酸殘基)通過CNBr或NHS化學(xué)法共價連接至4%交聯(lián)瓊脂糖基質(zhì)上,配基密度約1-3 mg/mL凝膠。
該結(jié)構(gòu)保證了凝集素活性位點(diǎn)朝向溶液,可有效捕獲巖藻糖基化靶標(biāo)。
·基本性能參數(shù)
中文名稱:AAL-瓊脂糖;瓊脂糖結(jié)合型橙黃網(wǎng)孢盤菌凝集素
英文名稱:Aleuria Aurantia Lectin (AAL), Agarose bound;AAL-Agarose
基質(zhì)特性
基質(zhì)成分:熱穩(wěn)定性交聯(lián)的 4% 瓊脂糖珠。
排阻分子量:約 2×1072×107 道爾頓 (Daltons)。
珠徑范圍:45 - 165 微米 (microns)。
穩(wěn)定性:該基質(zhì)在 pH 3-11 的溶液以及多種有機(jī)溶劑中均保持穩(wěn)定。
儲存條件:-20 °C,避光保存
供應(yīng)商:西安凱新生物科技有限公司
運(yùn)輸: 低溫運(yùn)輸
安全性:
操作時需佩戴防護(hù)裝備,避免接觸皮膚和眼睛。
如不慎接觸,請立即用大量清水沖洗,并尋求醫(yī)療幫助

·操作指南:清洗、洗脫與保存
使用前準(zhǔn)備
清洗:使用前準(zhǔn)備緩沖液清洗凝膠。
目的:這是為了去除為了穩(wěn)定凝集素活性而預(yù)先添加的糖分(如果不洗掉,這些糖會干擾后續(xù)的結(jié)合實(shí)驗(yàn))。
洗脫方法
推薦產(chǎn)品:推薦使用 糖蛋白洗脫液 來洗脫結(jié)合在該瓊脂糖-凝集素介質(zhì)上的糖復(fù)合物。
替代方案: 也可以使用含 100 mM L-巖藻糖 的緩沖鹽水進(jìn)行洗脫。
用后保存
清洗:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用數(shù)個柱體積的緩沖鹽水清洗凝膠,以去除殘留蛋白。
重懸:將凝膠重懸于含 0.08% 的sodium azide緩沖鹽水中。
儲存:在此狀態(tài)下保存( sodium azide作為防腐劑,可防止微生物生長)。
應(yīng)用領(lǐng)域
糖生物學(xué)研究
糖蛋白分離與純化:特異性富集含巖藻糖的糖蛋白,用于結(jié)構(gòu)解析或功能研究。
糖鏈結(jié)構(gòu)分析:作為探針識別巖藻糖修飾位點(diǎn),輔助糖基化模式研究。
分子分離與純化
親和層析:作為固相介質(zhì),高效分離目標(biāo)分子(如抗體、酶等),提升純化效率。
免疫共沉淀:結(jié)合巖藻糖修飾的抗原或受體,用于蛋白質(zhì)相互作用研究。
·相關(guān)試劑
LumiMount DAPI Fluorescence Mounting Medium
ProteOrange Protein Quantification Reagent, 500x
ProteOrange Protein Quantification Kit
sulfo-Cyanine7.5 antibody labeling kit
PKH2 cell membrane labeling kit
dsGreen Lyophilized qPCR kit
Azidobutyric acid NHS ester
BDP 581/591 maleimide
Azide-PEG2-aldehyde
Alkyne-PEG3-amine
BDP 581/591 amine
DiA, lipophilic tracer
Cyanine7.5 azide
Pyrene azide 2
Azide-PEG4-azide
AF 488 NHS ester
Annexin V, His Tag
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該試劑僅用于科研實(shí)驗(yàn),不可用于人體
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