酵母雙雜交，免疫共沉淀和pull-down是常用的蛋白互作實驗方法。雖然有多種實驗技術，但研究蛋白互作的科學家還是會被三個問題困擾：

 找不到合適的檢測低豐度蛋白的方法；

 免疫共沉淀無法還原生理狀態(tài)下的瞬時互作；

 共定位免疫熒光易受交叉反應干擾，定量精度堪憂……

這些難題如同無形的壁壘，讓科研人員對分子機制的理解始終隔著一層 “迷霧”。

如今，Duolink^®鄰位連接技術（PLA）的橫空出世，正以 “精準可視化+單分子級靈敏度” 的雙重優(yōu)勢，打破傳統(tǒng)技術局限，為生命科學研究帶來變革！

Duolink™采用PLA專業(yè)技術，通過一抗、二抗、DNA滾環(huán)復制，可將蛋白信號放大1000倍，實現(xiàn)單分子級別的靈敏度。即便是微量樣本、微弱互作、極罕見的低豐度表達，也能在內源水平可視化研究蛋白的互作、定位和定量。

圖1. Duolink^®實驗原理

除了性能優(yōu)勢，Duolink^®PLA 技術的實操性同樣出眾：操作流程與傳統(tǒng)方法相似，無需復雜設備，常規(guī)顯微鏡即可完成檢測；實驗僅需一天即可獲得結果。

圖2. Duolink^®實驗流程

Duolink^®PLA 檢測技術打破樣本類型限制，可兼容貼壁細胞、細胞離心涂片、甲醛固定細胞、甲醛固定組織切片、冷凍組織切片、新鮮組織切片多種樣本類型。

Duolink^®PLA 已實現(xiàn)多色檢測突破 —— 不僅能同時識別多種二聚體類型，還能同步分析蛋白的磷酸化狀態(tài)。讓科研效率翻倍！multicolor最多可在同一個樣本中檢測4個蛋白質事件。

圖3. 多色 EGFR:HER2 檢測示例：

黃色為異源二聚體形成，綠色、紅色分別為 EGFR、HER2 的磷酸化狀態(tài)

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