關(guān)鍵詞：心安顆粒；苦參堿；雙波長飛點式薄層掃描法
心安顆粒為中藥復(fù)方制劑，全方由6味中藥組成。該制劑具有清熱解毒，益氣養(yǎng)陰，活血通陽的功效，臨床主要用于治療病毒性心肌炎所致的心悸、胸悶及心律失常等疾病。處方中苦參是君藥，其主要有效成分是苦參堿、氧化苦參堿，具有水溶性，且苦參堿、氧化苦參堿是治療快速性心律失常的主要有效成分。為此我們采用雙波長飛點式薄層掃描儀對心安顆粒中苦參堿進行含量測定，作為控制心安顆粒的質(zhì)量指標(biāo)。
1 儀器與試藥
CS-9301PC島津雙波長飛點式薄層掃描儀，定量點樣毛細管2，5μL（Drummond Scientific Co．），硅膠G板（青島、煙臺），標(biāo)準(zhǔn)層析缸（上海），氯仿、苯、丙酮、醋酸乙酯及其他試劑均為分析純，苦參堿對照品（中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用，805-200005），心安顆粒（瀘州醫(yī)學(xué)院新藥中試中心）。
2 試驗條件
2．1 薄層色譜條件 展開劑為苯-丙酮-醋酸乙酯-濃氨試液（2：3：4：0.2），顯色方法：噴以碘化鉍鉀試液，再噴以少許5％亞硝酸鈉溶液至斑點顯色清晰。
2．2 薄層掃描條件的選擇 將苦參堿對照品溶液與供試品溶液分別取5μL，分別點于同一硅膠G板上，以上述展開劑展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀試液，再噴以少量5％亞硝酸鈉至斑點顯色清晰，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，放置2h后，照薄層掃描色譜法進行掃描 。
掃描方式雙波長反射式鋸齒形掃描，波長范圍400～700nm，掃描速度：200mm/s，λR=650nm，λs=480nm，狹縫0.4mm×0.4mm，SX=3。
3 方法與結(jié)果
3．1 對照品溶液的制備 取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥至恒重的苦參堿對照品精密稱定10.42mg，加無水乙醇制成每毫升含1.042mg的溶液。用無水乙醇稀釋為1.042，0.4168，0.2084，0.1042，0.04168mg/mL的溶液，每個濃度點樣2 μL繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（每個濃度同時點樣2個點）。以點樣質(zhì)量（濃度×點樣容積）為橫坐標(biāo)，峰面積值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程Y=4316.48X+101.58，r=0.9977（n=5），苦參堿在0.08336～2.084μg范圍內(nèi)與峰面積值呈良好線性關(guān)系。
3．2 供試品溶液的制備 取心安顆粒約3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入氯仿50mL，濃氨試液1mL，密塞，精密加入10mL0.2％鹽酸，時時振搖，放置24h后，濾過，精密量取25mL濾液，置60℃水浴鍋蒸發(fā)皿中蒸發(fā)干，用無水乙醇溶解，定容于5mL量瓶中，過濾，取濾液作為供試品溶液。
3．3 陰性對照溶液將心安顆粒處方中各味藥材（除苦參外）按制備工藝制備陰性樣品并按供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液。經(jīng)薄層層析、顯色、掃描，結(jié)果表明陰性對照溶液在苦參堿位置無吸收，處方中其它藥味對本測定無干擾
3．4 穩(wěn)定性試驗 精密吸取心安顆粒水煎⑦ 號樣品溶液重復(fù)點6點于同一硅膠G板上，首尾分別點苦參堿對照品溶液0.04168，0.4168μg，按規(guī)定條件展開，顯色固定，立即測定，室溫下掃描13次，第1次掃描至第6次掃描間隔30min，以后每次掃描間隔30min，結(jié)果表明樣品斑點峰面積值在4h內(nèi)穩(wěn)定，其RSD=3.503％。
3．5 精密度試驗 精密吸取心安顆粒水煎⑦號樣品溶液重復(fù)點6點于同一硅膠G板上，首尾分別點苦參堿對照品溶液0.04168，0.4168μg，按規(guī)定條件展開，顯色固定，立即測定，室溫下連續(xù)掃描5次，測得樣品斑點峰面積值對展開顯色后的第5斑點連續(xù)5次掃描測定，RSD=1.914％，說明儀器精密度較好。
3．6 重復(fù)性試驗 取心安顆粒水煎⑦號干浸膏，每份約3g，5份，精密稱定。按上述制備方法制備5份供試品溶液，按擬定的方法測定苦參堿含量百分率分別為0.02326，0.02328，0.02315，0.02209，0.02218，樣品RSD=4.126％，本法重現(xiàn)性較好。
3．7 回收率試驗 取心安顆粒水煎④ 號樣品溶液，分別精密吸取5份，各10mL，分別加入苦參堿對照品溶液1mL（3.37mg/mL）。按擬定的含量測定方法提取、測定，結(jié)果平均回收率為104.63％。
3．8 樣品苦參堿含量測定 取4批心安顆粒樣品（20030128、20030208、20030218、20030228），每批約3g，精密稱定。按供試品溶液制備方法制備供試品溶液。吸取供試品溶液各5μL，苦參堿對照品溶液10.14μg，點于同一硅膠G板上，依法展開顯色，進行掃描測定，計算樣品中苦參堿的含量。
4 討論
4．1 苦參堿顯色穩(wěn)定性受氣溫影響較大，天氣熱時，苦參堿顯色穩(wěn)定性比天氣冷時差，可能系顯色劑碘化鉍鉀在天氣熱時碘易升華而導(dǎo)致顯色穩(wěn)定性差。
4．2 通過對比試驗發(fā)現(xiàn)，用大孔吸附樹脂和～2o3處理過的樣品溶液顏色淺，苦參堿的含量過低，背景干擾大，苦參堿峰形不好。未用大孔吸附樹脂和 2O 處理的樣品溶液顏色較深，苦參堿含量較高，背景干擾小，苦參堿峰形光滑，峰與峰分離很好。
參考文獻：
[1] 梁生旺，劉偉主編．中藥制劑定量分析[M]．北京：中國中醫(yī)藥出版社．
[2] 中華人民共和國藥典（2000年版一部）[S]北京：化學(xué)工業(yè)出版社